Il percorso museale si snoda principalmente al primo piano ed è incentrato sulla stanza nella quale nacque il pontefice, trasformata in una cappella.
Tra gli oggetti più interessanti custoditi all’interno del museo sono l’arredo originale, alcuni degli arredi cardinalizi e papali provenienti dai Palazzi Vaticani, indumenti cardinalizi e papali, oggetti di uso quotidiano del Papa, oggetti liturgici e devozionali e oggetti inerenti le imprese alpinistiche di don Achille Ratti. Sono presenti anche una serie di medaglie commemorative e la produzione filatelica del pontificato di Pio XI.
Il cimelio più interessante è senz’altro l’apparecchio radiofonico realizzato personalmente da Guglielmo Marconi e donato al Pontefice.